Использование счетчика клеток может значительно повысить эффективность экспериментов по подсчету клеток. Однако при работе со сложными образцами могут возникнуть определенные трудности:
-Риск смещения выборки: Однопольныеподсчеты подвержены смещению распределения клеток. Смягчить это можно путем смешивания образцов и усреднения триплетных подсчетов.
-Ограничения автофокусировки:Производительность падает в образцах с низкой концентрацией/гетерогенных образцах, но стабильна при умеренной плотности и однородной морфологии.
-Пробелы в обнаружении флуоресценции: Одноканальные системы возбуждениянедооценивают двойные флуоресцентные маркеры, ограничивая многопараметрический анализ, несмотря на экономию средств.
Для исследователей точность счетчика клеток обычно оценивается по следующим трем критериям:
-Дважды проверьте идентификацию устройств, сравнив исходное изображение клеток с наложением обнаружения прибора: Оцените точность распознавания клеток, проверив, насколько точно устройство обрисовывает клетки на захваченном изображении.
-Проведите повторные эксперименты по подсчету для оценки межгруппового CV (коэффициента вариации): Выполните несколько повторных измерений, чтобы определить согласованность и воспроизводимость подсчетов.
-Сравните результаты сПроточной цитометриейили ручным подсчетом: Проверьте производительность прибора, сравнив его результаты с результатами, полученными с помощью проточной цитометрии или традиционных методов ручного подсчета.
Для повышения точности подсчета клеток был разработанФлуоресцентный счетчик клетокс уделением особого внимания трем критическим параметрам производительности: стабильности изображения, четкости изображения и возможностям алгоритмического анализа. Каждый аспект прошел обширную оптимизацию и технологическое обновление.Интересно узнать о прорывных основных технологиях, лежащих в основе этих улучшений? Продолжайте читать — детали могут вас удивить.
Полевая визуализация для минимизации систематической ошибки
Чтобы устранить ограничения однопольной визуализации и уменьшить систематическую ошибку, счетчик клеток C200FL оснащен режимом подсчета в 3 полях. Эта конструкция значительно расширяет область подсчета, достигая в общей сложности 7,6 мм². Распределяя поля по разным областям образца, этот подход минимизирует смещение выборки и обеспечивает более точное представление закономерностей распределения клеток.
Линейность подсчета клеток CHO (R²＞0,999)
В C200FL используется система визуализации с фиксированным фокусным расстоянием, которая минимизирует колебания, вызванные алгоритмами автофокусировки, и значительно сокращает время подсчета. Эта конструкция обеспечивает стабильное качество изображения при многократном захвате, тем самым снижая коэффициент вариации (CV) при повторных измерениях. Четкое и стабильное изображение обеспечивает надежную основу для точного распознавания клеток алгоритмом анализа.
Интеллектуальный алгоритм повышает точность распознавания клеток
В дополнение к обычным параметрам, таким как диаметр, округлость и пороги флуоресценции, мы внедрили расширенные параметры интерпретации границ клеток. Это позволяет точно идентифицировать края клеток, повышая точность обнаружения сгруппированных клеток и улучшая общую производительность распознавания клеток.
Примечание: Желтый кружок указывает на скопления клеток.
Серия счетчиков клеток RWD оснащена независимой оптической конструкцией с двумя флуоресцентными каналами. Модель C200FL оснащена высокопроизводительными оптическими компонентами и алгоритмами очистки фона, что позволяет эффективно захватывать слабые сигналы флуоресценции, сводя к минимуму фоновый шум. Это приводит к получению четких, свободных от шума флуоресцентных изображений. В сравнительных испытаниях с проточной цитометрией скорость трансфекции, обнаруженная обеими системами, различалась не более чем на 10%.
Подсчет флуоресценции клеток периферической крови PBMC AOPI
Флуоресцентный счетчик клетокпреодолевает ограничения традиционных счетчиков клеток. Он предоставляет исследователям эффективные и точные решения для подсчета клеток, удовлетворяя потребность отрасли в высокоточных данных. Кроме того, его программное обеспечение соответствует требованиям FDA 21 CFR PART 11, гарантируя полное удовлетворение потребностей корпоративных пользователей в электронных записях и контроле доступа.
