การใช้เครื่องนับเซลล์สามารถปรับปรุงประสิทธิภาพของการทดลองนับเซลล์ได้อย่างมาก อย่างไรก็ตาม อาจเกิดความท้าทายบางอย่างเมื่อจัดการกับตัวอย่างที่ซับซ้อน:
-ความเสี่ยงของอคติในการสุ่มตัวอย่าง: สนามเดียว การนับมีแนวโน้มที่จะเกิดอคติในการกระจายตัวของเซลล์ บรรเทาโดยการผสมตัวอย่างและเฉลี่ยการนับสามครั้ง
-ข้อจำกัดของโฟกัสอัตโนมัติ:ประสิทธิภาพลดลงในตัวอย่างที่มีความเข้มข้นต่ำ/ไม่สม่ำเสมอ แต่คงที่เมื่อมีความหนาแน่นปานกลางและสัณฐานวิทยาที่สม่ำเสมอ
-ช่องว่างการตรวจจับการเรืองแสง: ระบบกระตุ้นเดี่ยว ประเมินค่าต่ำไปสำหรับเครื่องหมายการเรืองแสงแบบคู่ จำกัดการวิเคราะห์หลายพารามิเตอร์แม้ว่าจะประหยัดค่าใช้จ่ายก็ตาม
สำหรับนักวิจัย ความแม่นยำของเครื่องนับเซลล์มักจะประเมินโดยใช้เกณฑ์สามข้อต่อไปนี้:
-ตรวจสอบการระบุโดยอุปกรณ์ด้วย เปรียบเทียบภาพเซลล์ดั้งเดิมกับการซ้อนทับการตรวจจับของเครื่องมือ: ประเมินความแม่นยำของการรับรู้เซลล์โดยการตรวจสอบว่าอุปกรณ์ร่างโครงร่างเซลล์ในภาพที่ถ่ายมาแม่นยำเพียงใด
-ดำเนินการทดลองนับซ้ำเพื่อประเมินค่าสัมประสิทธิ์การแปรผัน (CV) ระหว่างกลุ่ม: ดำเนินการวัดซ้ำหลายครั้งเพื่อกำหนดความสอดคล้องและความสามารถในการทำซ้ำของการนับ
-เปรียบเทียบผลลัพธ์กับ Flow Cytometry หรือการนับด้วยตนเอง: ตรวจสอบประสิทธิภาพของเครื่องมือโดยการเปรียบเทียบผลลัพธ์กับผลลัพธ์ที่ได้จาก flow cytometry หรือวิธีการนับด้วยตนเองแบบดั้งเดิม
เพื่อเพิ่มความแม่นยำในการนับเซลล์ RWD C200FL เครื่องนับเซลล์เรืองแสง ได้รับการพัฒนาโดยเน้นที่มิติประสิทธิภาพที่สำคัญสามประการ ได้แก่ ความเสถียรของภาพ ความคมชัดของภาพ และความสามารถในการวิเคราะห์อัลกอริทึม แต่ละด้านได้รับการปรับปรุงอย่างกว้างขวางและการอัปเกรดทางเทคโนโลยี
อยากรู้เกี่ยวกับเทคโนโลยีหลักที่ก้าวล้ำเบื้องหลังการปรับปรุงเหล่านี้หรือไม่? อ่านต่อ — รายละเอียดอาจทำให้คุณประหลาดใจ
เพื่อแก้ไขข้อจำกัดของการถ่ายภาพสนามเดียวและลดข้อผิดพลาดอย่างเป็นระบบ เครื่องนับเซลล์ C200FL มาพร้อมกับโหมดการนับ 3 สนาม การออกแบบนี้ช่วยขยายพื้นที่การนับได้อย่างมาก โดยมีพื้นที่รวม 7.6 มม.² ด้วยการกระจายสนามในภูมิภาคต่างๆ ของตัวอย่าง วิธีการนี้ช่วยลดอคติในการสุ่มตัวอย่างและให้การแสดงรูปแบบการกระจายตัวของเซลล์ที่แม่นยำยิ่งขึ้น
C200FL ใช้ระบบถ่ายภาพความยาวโฟกัสคงที่ ซึ่งช่วยลดความผันผวนที่เกิดจากอัลกอริทึมโฟกัสอัตโนมัติและลดเวลาในการนับลงอย่างมาก การออกแบบนี้ช่วยให้มั่นใจได้ถึงคุณภาพของภาพที่สอดคล้องกันในการถ่ายภาพหลายครั้ง ซึ่งช่วยลดค่าสัมประสิทธิ์การแปรผัน (CV) ในการวัดซ้ำ การถ่ายภาพที่ชัดเจนและเสถียรเป็นรากฐานที่เชื่อถือได้สำหรับการรับรู้เซลล์ที่แม่นยำโดยอัลกอริทึมการวิเคราะห์
นอกเหนือจากพารามิเตอร์ทั่วไป เช่น เส้นผ่านศูนย์กลาง ความกลม และเกณฑ์การเรืองแสง เราได้ใช้พารามิเตอร์การตีความขอบเขตเซลล์ขั้นสูง ซึ่งช่วยให้สามารถระบุขอบเซลล์ได้อย่างแม่นยำ ปรับปรุงความแม่นยำในการตรวจจับเซลล์ที่จับกลุ่มและเพิ่มประสิทธิภาพการรับรู้เซลล์โดยรวม
เครื่องนับเซลล์ RWD มีการออกแบบออปติคัลช่องเรืองแสงคู่แบบอิสระ รุ่น C200FL มาพร้อมกับส่วนประกอบออปติคัลประสิทธิภาพสูงและอัลกอริทึมการทำให้บริสุทธิ์พื้นหลัง ทำให้สามารถจับสัญญาณการเรืองแสงที่อ่อนแอได้อย่างมีประสิทธิภาพในขณะที่ลดสัญญาณรบกวนพื้นหลัง ซึ่งส่งผลให้ได้ภาพเรืองแสงที่ชัดเจนและปราศจากสัญญาณรบกวน ในการทดสอบเปรียบเทียบกับ flow cytometry อัตราการส่งผ่านที่ตรวจพบโดยทั้งสองระบบแตกต่างกันไม่เกิน 10%
ด้วยเทคโนโลยีหลัก เช่น การถ่ายภาพหลายสนาม การออกแบบออปติคัลประสิทธิภาพสูง และอัลกอริทึมการรับรู้เซลล์ที่แม่นยำ C200FL เครื่องนับเซลล์เรืองแสง เอาชนะข้อจำกัดของเครื่องนับเซลล์แบบดั้งเดิมได้สำเร็จ โดยมอบโซลูชันการนับเซลล์ที่มีประสิทธิภาพและแม่นยำแก่นักวิจัย ตอบสนองความต้องการของอุตสาหกรรมสำหรับข้อมูลที่มีความแม่นยำสูง นอกจากนี้ การออกแบบซอฟต์แวร์ยังเป็นไปตามข้อกำหนด FDA 21 CFR PART 11 ทำให้มั่นใจได้ว่าความต้องการของผู้ใช้องค์กรสำหรับบันทึกอิเล็กทรอนิกส์และการควบคุมการเข้าถึงนั้นเป็นไปตามข้อกำหนดอย่างครบถ้วน
